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穩(wěn)定細(xì)胞株篩選

簡(jiǎn)要描述:穩(wěn)定細(xì)胞株篩選是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白,或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。

  • 更新時(shí)間:2024-10-12
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 訪  問(wèn)  量:1102

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

一、服務(wù)介紹

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選常用物理方法(電轉(zhuǎn))、化學(xué)方法(脂質(zhì)體等)、生物方法(病毒)。


二、實(shí)驗(yàn)原理

外源基因在細(xì)胞中的表達(dá)可分為兩大類,一類是瞬時(shí)表達(dá),一類是穩(wěn)定表達(dá)(又叫表達(dá))。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上,使宿主細(xì)胞可*表達(dá)目的基因。建立穩(wěn)定細(xì)胞株,一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素(hygromycin)、和嘌呤霉素(puromycin)。


三、實(shí)驗(yàn)流程

1、載體構(gòu)建(表達(dá)質(zhì)粒載體、病毒載體);

2、轉(zhuǎn)染/感染;

3、目的蛋白初步檢測(cè);

4、抗生素篩選;


5、目的蛋白再次檢測(cè)(定性/半定量);

6、單克隆細(xì)胞株穩(wěn)定性檢測(cè)。


四、 客戶提供

培養(yǎng)好的細(xì)胞


五、 公司提供:

基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株

實(shí)驗(yàn)周期:大約3-4月左右,具體需要根據(jù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。


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